L'EF 100 mm F/2,8 Macro USM est un télézoom de taille intermédiaire doté de fonctions macro avec un grandissement de 1,0×. Doté d'un diaphragme à huit lamelles, il permet de créer un flou d'arrière-plan sur lequel le sujet se détache. Cet objectif dispose d'un limiteur de plage de mise au point qui restreint la plage de focales pour améliorer la vitesse d'autofocus.
 
Le moteur USM de type annulaire de Canon utilise des vibrations de fréquence ultrasonique et assure ainsi une mise au point rapide, précise et quasiment silencieuse. La mise au point manuelle permanente, qui s'effectue grâce à la large bague de mise au point manuelle (qui ne bouge pas pendant l'autofocus), permet un ajustement subtil et instantané, chaque fois que le photographe le souhaite.
 
Le traitement Super Spectra garantit un équilibre chromatique précis et un contraste élevé ; il élimine également la lumière parasite et les images fantômes en absorbant les rayons lumineux parfois réfléchis par certains éléments optiques internes ou par le capteur d'image.